REKOMBINERING

utviklingen av genteknologi revolusjonerte moderne biologi, slik at direkte manipulering av en organismes DNA. Nøkkelen til denne teknologien var oppdagelsen av restriksjonsenzymer, proteiner som når renset, kuttet DNA ved presise korte sekvenser in vitro. Ulike DNA-molekyler, kuttet med samme restriksjonsenzym( er), kan da sammenføyes AV DNA-ligase for å generere et rekombinant molekyl. Slike genetisk utviklet plasmid DNA ble rutinemessig omdannet Til Escherichia coli for videre analyse og manipulasjon. Selv om disse gentekniske teknikkene er kraftige og fortsetter å bli brukt i dag, har en ny, svært effektiv metode for direkte modifisering AV DNA i E. coli og andre bakterier blitt utviklet de siste ~15 årene: rekombinering.

Rekombinering er in vivo homolog rekombinasjonsmediert genteknologi. Den homologe rekombinasjonen medieres av bakteriofagbaserte rekombinasjonssystemer som ? Rødt system, RecET Fra Rac profet, eller andre. I motsetning til klassisk in vitro genteknologi er rekombinering ikke avhengig av restriksjonsenzymer. Dermed er plasseringen av restriksjonssider ikke lenger et problem, og brukeren definerer konstruksjonen og dens plassering til grunnparet. Som genteknologi kan rekombinering brukes til å lage slettinger, punktmutasjoner, duplikasjoner, inversjoner, fusjoner og koder. Kort sagt utføres rekombinering ved å introdusere lineære DNA-substrater som inneholder den ønskede forandringen og korte flankehomologier til mål-DNA i celler som uttrykker fagkodede rekombinasjonsenzymer. Disse enzymene rekombinerer det lineære DNA på målet, noe som gir rekombinante molekyler.

Legg igjen en kommentar

Din e-postadresse vil ikke bli publisert.