Rekombinant Erytropoietin

Generelle Betraktninger

Rekombinante humane erytropoietiner (RHUEPO) er erytropoiesestimulerende midler (ESA) som brukes ved behandling av anemi som følge av kronisk nyresykdom, behandling av kreft eller HIV-infeksjon. De brukes også perioperativt hos noen kirurgiske pasienter. For tiden markedsføres tre former, inkludert epoetin α (Epogen, Epogin, Eprex og Procrit), epoetin β (NeoRecormon og Recormon), epoetin δ (Dynepo) og epoetin Ω (Epomax). Epoetin ζ (zeta) er en betegnelse som brukes for to biotilsvarende former for epoetin alfa som markedsføres Som Silapo (Stada) og Retacrit (Hospira) (Tabell 7.2). I tillegg er darbopoietin en hyperglykosylert mutant form av epoetin α med fem aminosyreforandringer som er glykoenginert for å forlenge serumhalveringstiden. Den første biosimilar rHuEPO som mottok EMEA markedsføringstillatelse var Binocrit i 2007 (epoetin α, Sandoz GmbH, Østerrike) og dette ble utviklet som en biosimilar Form Av Eprex (Janssen-Cilag).

TABELL 7.2. Prekliniske Studier Utført For Å Støtte Farmakokinetiske, Farmakodynamiske Og Sikkerhetsevalueringer for Biotilsvarende Versjoner av Somatropin (Humant Veksthormon): Det Europeiske Legemiddelkontoret (Ema))

år godkjent I EU handelsnavn Firma Referanseprodukt IN vitro PD in vivo preklinisk PK in vivo preklinisk pd in vivo preklinisk sikkerhet
2006 Omnitrope Sandoz GmbH Genotropin Evaluert som en del av 14 dagers toksisitetsstudie hos rotter Hypofysektomert rotte 10 dager vektøkning
Rotte 10 dager tibialbreddeanalyse
14 dager hos rotter, SC
2006 Valtropin BioPartners GmbH Humatrope PK evaluert som en del av 28-og 90-dagers toksikologistudier samt frittstående studier på kaniner (IV, SC) Sprague Dawley hypofysectomized rotte 10 dager vektøkning analyse to kombinerte 28 og 90 dager hos rotter og mus
Omfattende reproduksjonstoksisitetsstudier hos rotter og kaniner
sikkerhetsfarmakologi hos mus, marsvin, kaniner

PD, farmakodynamikk; PK, farmakokinetikk; S. c., subkutan; IV, intravenøs; EU, Den Europeiske Union.

Rekombinant human EPOa er en 165-aminosyre enkeltpolypeptidkjede som inneholder tre n-koblede glykosyleringssteder ved asn24, Asn38 og Asn83 og ett o-koblede sted Ved Ser126 . Disse områdene er sterkt glykosylert og karbohydratinnholdet kan utgjøre opptil 40% av molekylmassen. Selv om karbohydratdelene ikke er direkte involvert I epo-reseptorbinding, kan de i stor grad påvirke serumhalveringstiden og dermed in vivo-potens. rHuEPOa danner en fire-helix buntstruktur forbundet med to mindre strukturerte sløyfer og den ternære strukturen stabiliseres av to disulfidbroer.

til tross for to tiår med klinisk bruk, er clearance pathways for rHuEPO ikke godt forstått . Desialylerte erytropoietiner elimineres raskt av asialoglykoproteinreseptoren i leverparenkymale celler, men hepatisk clearance ser ikke ut til å være hovedclearance for intakte rHuEPOs, og mer enn 90% av oligosakkarider er fullstendig sialylert . Erytropoietin reseptormediert clearance og nedbrytning i benmargen har også blitt antatt å spille en fremtredende rolle; evaluering av rhuepo-varianter med forskjellige reseptoraffiniteter klarte imidlertid ikke å identifisere en signifikant rolle av reseptormediert opptak i legemiddelclearance . Det som er godt etablert er at modifikasjoner i glykosylering i stor grad kan påvirke både legemiddelclearance og reseptorbinding. Generelt er graden av glykosylering positivt korrelert med legemiddelhalveringstiden, men ettersom glykosylering øker bindingsaffiniteten TIL EPO-reseptorer, reduseres. Etter hvert som glykaninnholdet øker, gjør DET også den hydrodynamiske diameteren AV EPO. Gitt at sialinsyrer inneholder negative ladninger, vil et negativt elektrisk felt vokse ettersom sialinsyreinnholdet øker, og dette antas å påvirke reseptorbindingen negativt. I tilfelle av darbopoietin, som er en hyperglykosylert mutantversjon av epoetin, er den økte halveringstiden mer enn kompenserer for redusert reseptorbinding og lengre doseringsintervaller mulig ved terapeutisk bruk. Gitt disse egenskapene er kontrollen av glykosylering svært kritisk for å opprettholde produktkvaliteten. rHuEPOa inneholder over 35 Forskjellige n-koblede og 6 o-koblede oligosakkarider og produksjonskontroller for å sikre mye-til-mye konsistens er utfordrende for denne klassen av narkotika . Gitt forskjellene i cellelinjer, produksjon og renseprosesser, er det sannsynlig at biosimilarer vil inneholde betydelige forskjeller i oligosakkaridinnhold i forhold til innovatørprodukter. Av denne grunn kan tidlig evaluering av komparativ PK vise seg å være et nyttig verktøy tidlig i cellelinjeutvikling og prosessforbedring.

en sjelden, men signifikant risiko for rhuepo-pasienter er utviklingen av nøytraliserende ADAs. Pasienter som utvikler nøytraliserende anti-erytropoietin antistoffer har risiko for erytroaplasi( PRCA), som kan kreve transfusjoner av røde blodlegemer. Generelt reagerer de fleste tilfeller på immunsuppressiv behandling, men noen krever lengre perioder med infusjoner .

selv om det tidligere var sjeldent, var det tidlig på 1990-tallet en betydelig økning hos pasienter som fikk rHuEPO som utviklet antistoff-positiv PRCA, med over 160 tilfeller rapportert innen 2003 . De fleste av disse tilfellene har vært forbundet med innføring av formuleringsendringer i ett enkelt produkt (Eprex, epoetin α, Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA), selv om mekanismen for økt antigenisitet ikke er klart identifisert. I utgangspunktet ble det antatt at erstatning av humant serumalbumin (HSA) med polysorbat 80 (PS80) i formuleringen kan ha ført til dannelsen AV legemiddelbelastede PS80-mikeller, som kunne virke på en adjuvant måte for å bryte immuntoleranse. Dette førte imidlertid ikke til tilsvarende problemer med et tilsvarende formulert epoetin β-produkt. En annen hypotese har blitt stilt som leachates produsert fra ubestrøket gummi propper kan gi en adjuvant effekt og slike leachates har vist seg å øke antigenicity til ovalbumin i mus. Administrasjonsveien kan også ha spilt en faktor da de fleste PRCA-pasienter hadde fått legemiddel ved subkutan injeksjon, en potensiell risikofaktor for nedbrytning av immuntoleranse mot proteinbehandling.

Epogen danner en fire-helix bunt struktur som kan overvåkes for conformational integritet VED UV sirkulær dikromisme og tryptofan fluorescens utslipp spektroskopi. I en komparativ analyse ble Epogen og Eprex evaluert for ternære strukturelle forskjeller. Bulk Og renset Epogen ble vist å ha lignende lokale tryptofanmiljøer, Men Eprex viste signifikant avvik, noe som tyder på mer bevegelsesfrihet. Videre tillot termisk utfoldelse ved temperaturspenning (0-100°C) nesten fullstendig reversibilitet av sekundær struktur Med Epogen, men bare delvis reversibilitet med Eprex . Dette illustrerer at strukturelle endringer kan eksistere mellom to lignende legemidler, men det er for tiden liten forståelse for hvordan disse endringene kan påvirke sikkerhet, effekt eller immunogenitet, og derfor vil det være nødvendig med omfattende in vivo-testing for å fastslå sammenlignbarhet. Når det gjelder rHuEPO, vil risikoen for ANTISTOFFMEDIERT PRCA være en spesiell utfordring å forutsi gitt den lave nytten av prekliniske modeller, den begrensede evnen til små kliniske studier til å oppdage sjeldne hendelser og derfor behovet for omfattende overvåkning etter markedsføring.

Legg igjen en kommentar

Din e-postadresse vil ikke bli publisert.