재조합 항체:개요

재조합 항체(랩)는 합성 유전자를 사용하여 시험 관내에서 생성되는 단일 클론 항체이다. 전통적인 하이브리도마 기반 기술을 사용하여 생산되는 단일 클론 항체(맙)와 달리 랩은 생산 공정에서 하이브리도마 및 동물이 필요하지 않습니다.

단클론 항체와 재조합 항체는 모두 생물 의학 및 독성 연구에 사용될 수 있으며 암,자가 면역 질환 및 기타 여러 질병에 대한 효과적인 치료 치료법입니다. 그러나,단일 클론 항체는 세포 특이 적 항원을 결합 및 중화 또는 파괴 할 수있는 능력으로 인해 생물 의학 및 의학에서 가장 일반적인 도구 중 하나가되었지만,복수의 제조 방법은 그 과정에서 사용되는 동물에게 상당한 고통과 불편 함을 야기한다.

따라서 호주,독일,네덜란드 및 유나이티드 킹던 정부는 시험관 내 방법에 찬성하여 금지했다. 미국은 또한 맵의 생산을위한 기본 절차로 시험 관내 방법의 사용을 승인.

그러나,하이브리도마를 포함하는 시험관 내 방법은 또한 다음을 포함하는 그 자체의 한계를 가지고 있음을 주목하는 것이 중요하다:

  • 이 과정에서 사용 된 동물의 예방 접종 및 후속 안락사가 필요합니다.
  • 느리고 노동 집약적.
  • 종종 면역 반응을 일으키므로 항체를 환자에게 투여하기 전에 변경하고”인간화”해야합니다.

재조합 항체의 제조

기본적으로,재조합 항체는 합성 유전자를 사용하여 시험관 내에서 생성된 단일 클론 항체이다. 이 기술은 소스 세포에서 항체 유전자를 회수하고,유전자를 적절한 파지 벡터로 증폭 및 복제하고,숙주(박테리아,효모 또는 포유류 세포주)에 벡터를 도입하고,적절한 양의 기능성 항체 발현을 달성하는 것을 포함합니다.

재조합 항체는 적절한 올리고뉴클레오티드 프라이머 또는 혼성화 프로브가 이용 가능한 경우에 제공된 항체-생성 동물의 임의의 종으로부터 복제될 수 있다. 항체 유전자를 조작하는 능력은 또한 시험관 내에서 새로운 항체 및 항체 단편을 생성하는 것을 가능하게한다. 일반적으로 파지 또는 효모로 표현 된 디스플레이 라이브러리는 항체 서열의 이러한 변화로부터 발생하는 바람직한 특성을 선택하기 위해 분석 될 수있다.

당신은 어떻게 당신의 원한 항체를 표시하는 그들을 선정합니까? 당신은 패닝이라는 과정을 통해 그것을 할 수 있습니다. 가장 간단한 패닝 절차 중 하나는 일반적인 엘리사 절차의 변형입니다. 이를 위해,당신은 고체에 고정 된 대상으로 항체 라이브러리를 배양. 모든 결합되지 않은 파지는 세척을 통해 제거되고 특이 적으로 결합 된 파지는 대장균 세포를 감염시킴으로써 용출되고 증폭된다. 이 과정은 3~4 회 반복되어 가장 높은 친 화성 및 안정성을 가진 항체를 표시하는 파지를 분리합니다. 선정한 항체를 위한 유전자는 친화력 성숙을 염기서열화되고 복종됩니다. 제일 항체를 위한 유전자는 대규모 생산을 위한 적합한 표정 체계로 그 때 옮겨질 수 있습니다.

재조합 항체 사용의 장점

  • 증가 재현성 및 제어. 그들은 하이브리드 기반 시스템에서 호스트 동물에 주입 한 후 연구자들은 종종 항원의 제어를 잃게하는 동안,재조합 항체 생산은 그들에게 항원을 통해 더 많은 제어를 할 수 있습니다. 랩은 그들을 인코딩하는 시퀀스에 의해 정의되기 때문에,그들은 더 신뢰할 수 있고 맵보다 더 재현 가능한 결과를 제공합니다. 실험 조건을 조정함으로써 연구자들은 항원 또는 항원 특성에 대한 항체의 분리를 쉽게 선호 할 수 있습니다.
  • 생산 시간 감소. 재조합형 항체 기술을 사용하여 항원 특이 적 항체를 8 주 이내에 생산할 수 있습니다. 한편,하이브리도마 기술은 적합한 항체를 생산하기 위해 최소 4 개월이 필요하다.
  • 아이소 타입 변환. 바람직한 재조합 항체 단편은 적절한 상수 도메인을 추가함으로써 상이한 종,이소형 또는 아형으로 쉽게 전환될 수 있다. 이를 통해 항체를 더 바람직한 형식으로 쉽게 전환 할 수 있습니다.
  • 무동물성 기술. 재조합형 항체는 과정에 있는 어떤 동물든지 사용 없이 생성할 수 있습니다. 이것은 전통적인 단일 클론 항체 생산과 일반적으로 관련된 수많은 윤리적 및 동물 복지 문제를 제거합니다.

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